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PCR实验室
    发布时间: 2020-04-01 09:00    

PCR即聚合酶链式反应,是分子生物学研究和实验的常规方法,也是生物学、医学临床等领域广泛应用的实验技术。其特点是能将微量的 DNA 大幅增加。实验室分为四个区域,进入各工作区域必须严格按照单一方向进行,不同的工作区域使用不同的工作服(例如不同的颜色)。


PCR实验室


PCR即聚合酶链式反应,是分子生物学研究和实验的常规方法,也是生物学、医学临床等领域广泛应用的实验技术。其特点是能将微量的 DNA 大幅增加。实验室分为四个区域,进入各工作区域必须严格按照单一方向进行,不同的工作区域使用不同的工作服(例如不同的颜色)。工作人员离开各工作区域时,不得将工作服带出,四区域分别为:


       1.试剂配制区
       2.样品处理区
       3.核酸扩增区
       4.产物分析区
   所谓组合形式 PCR 实验室, 是指完成 PCR 四个实验过程的实验用房相邻布置,组成独立实验区域的形式。对于组合形式 PCR 实验室,由于各个实验间集中布置,容易造成相互干扰,因此,对总体布局以及屏障系统具有一定的要求。各室在入口处设缓冲间,以减少室内外空气交换。试剂配制室及样品处理室宜呈微正压,以防外界含核酸气溶胶的空气进入,造成污染;核酸扩增室及产物分析室应呈微负压,以防含核酸的气溶胶扩散出去污染试剂与样品。

如果使用荧光 PCR 仪,扩增室和产物分析室可以合并。

若房间进深允许,可设 PCR 内部专用走廊。需要指出的是在减少室内外空气交换方面,缓冲间比专用走廊更有意义。

各个区域之间应具备单向的实验工艺流、物流、人流与气流,形成单向流程的保护屏障,避免实验之间的相互干扰,防止核酸气溶胶对实验过程造成污染产生假性结果。

PCR实验室的空气流向必须严格按照试剂储存和准备区→标本制备区→扩增区→扩增产物分析区空气压力逐渐递减方式进行,防止扩增产物顺空气气流进入扩增前的区域。需要严格的通风设计,若通风设计不合理,会使风速流向混乱,甚至危害人们健康。

进入实验室区域工作人员应该按照以下路径:

公共清洁区——更衣间(更换洁净服)——缓冲间——污染实验区

工作人员退出实验室的路径为:

污染试验区——缓冲间——淋浴间(有条件的可设置)——更衣间——公共清洁区

 

1、环境要求

通风、温度和湿度实验室的长期使用,有毒、有害等污浊气体不及时排出会危害室内操作人员健康。实验室良好的通风环境是必要前提。除了实验室建筑选址的朝向和所处地域的气候特征,实验室通风系统也是必须考虑的问题。通风柜作为保持实验室内安全、卫生的重要柜体,是建立一个科学实验室必不可少的组成部分。

洁净度实验室的洁净,除了实验室地面、实验室器具的清洁,还要考虑实验室内空气的洁净度。不良的空气质量会影响实验的正常进行,扩散到空气中的有害物质也会危害到人体健康。

 

2、设施要求

给排水、排污系统标准规范的实验室,都会配置有供水、排水和排污系统,实验台配置水池、滴水架、排水槽,通风柜与通风柜管道联通。

 

3、实验室工作人员要求

PCR实验室内工作人员必须参加由国家卫生部或各省临床检验中心举办的临床基因扩增培训班,并持证上岗。PCR实验室通过验收,实验室至少必须应有两个以上持有“临床基因检测上岗证”。PCR实验室必须建立严格的实验室管理制度、建立标准化操作程序(SOP)、建立系列质量管理文件等,确保实验室日常运行符合国家卫生部的要求,确保检测结果准确、确保实验室卫生安全,确保实验室长期稳定运行。

 

4、标准的PCR实验室设计规范

4.1、主体结构

主体为彩钢板、铝合金型材。室内所有阴角、阳角均采用铝合金 50 内圆角铝,从而解决容易污染、积尘、不易清扫等问题。结构牢固,线条简明,美观大方,密封性好。
   4.3、标准的三区分隔和气压调节
    PCR 过程分成试剂准备、标本制备和 PCR 扩增检测三个独立的实验区。整个区域有一个整体缓冲走廊。每个独立实验区设置有缓冲区, 同时各区通过气压调节,使整个 PCR 实验过程中试剂和标本免受气溶胶的污染并降低扩增产物对人员和环境的污染。
   可打开缓冲区Ⅰ,缓冲区Ⅱ和 PCR 扩增区的排风扇往外排气,在实验区的外墙上和各扇门上都安装有风量可调的回风口,空气通过回风口向室内换气。
   4.3、消毒
   在三个实验区和三个缓冲区顶部以及传送窗内部安装有紫外灯,供消毒用。
   在试剂准备区和标本制备区 还设置移动紫外线灯,对实验桌进行局部消毒。

4.4、机械连锁不锈钢传递窗

试剂和标本通过机械连锁不锈钢(不建议使用电子连锁方式)传递窗传递,保证试剂和标本在传递过程中不受污染(人物分流)。

4.5、地面

地面建议使用 PVC 卷材地面或自流坪地面,整体性好。便于进行清扫,耐腐蚀。没有条件的也可采用水磨石地面,或大块的瓷砖(至少 800mm×800mm)接缝需要小于 2mm。

4.6、照明
   灯具要选用净化灯具,能达到便于清洗、不积尘的特点。

 

 

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